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液(ye)相色(se)譜柱的(de)使用方法

瀏(liu)覽(lan)： 4205| 更新(xin)時間：2016-11-09 |

液相色(se)譜柱的(de)使用方法：

液(ye)相色(se)譜柱在(zai)使用前(qian)，進(jin)行(xing)柱的(de)性能(neng)測試(shi)，並將結果保存(cun)起來(lai)，作為今(jin)後(hou)評(ping)價柱性能(neng)變(bian)化(hua)的(de)參(can)考(kao)。但(dan)要留(liu)意(yi)：液(ye)相色(se)譜柱柱性能(neng)可能(neng)由於(yu)所(suo)使用的樣品(pin)、活動相、柱溫等條(tiao)件的(de)差異(yi)而(er)有所(suo)不同(tong)；另外，在(zai)做柱性能(neng)測試(shi)時是按(an)照(zhao)色(se)譜柱出(chu)廠(chang)報(bao)告中(zhong)的條(tiao)件進(jin)行(xing)（出(chu)廠(chang)測試(shi)所(suo)使用的條件(jian)是(shi)*條(tiao)件），只(zhi)有這(zhe)樣(yang)，測得(de)的(de)結果才(cai)有可比性。

1、樣(yang)品的前(qian)處(chu)理(li)：

a、使用活動相溶解(jie)樣品(pin)。

b、使用予處理(li)柱除(chu)往樣(yang)品(pin)中(zhong)的強極(ji)性或(huo)與柱填(tian)料產生不(bu)可逆吸附(fu)的雜(za)質。

c、使用0.45μm的過(guo)濾(lv)膜(mo)過(guo)濾(lv)除(chu)往微(wei)粒(li)雜(za)質。

2、活動相的配(pei)制：

液(ye)相色(se)譜是(shi)樣品(pin)組分(fen)在柱填(tian)料與活動相之間質量交(jiao)換(huan)而(er)達到(dao)分(fen)離(li)的目(mu)的(de)，因(yin)此要求(qiu)活動相具(ju)備以(yi)下的特點：

a、活動相對(dui)樣品具(ju)有壹定的溶解(jie)能(neng)力(li)，保證樣品組分(fen)不會沈澱(dian)在柱中(zhong)（或長時間保存(cun)在(zai)柱中(zhong)）。

b、活動相具(ju)有壹定惰性，與(yu)樣品不產生化(hua)學反(fan)應（特殊(shu)情(qing)況(kuang)除(chu)外）。

c、活動相的黏(nian)度(du)要盡量小，以便(bian)在(zai)使用較長的分(fen)析柱時能(neng)得(de)到(dao)好(hao)的(de)分(fen)離(li)效果；同(tong)時降(jiang)低柱壓(ya)降(jiang)，延長液體(ti)泵的使用壽(shou)命(ming)（可運(yun)用(yong)進步溫度的(de)方法降(jiang)低活動相的黏(nian)度(du)）。

d、活動相的物(wu)化性質要與使用的檢(jian)測器(qi)相適(shi)應。如使用UV檢(jian)測器(qi)，使用對(dui)紫(zi)外吸收較低的(de)溶劑(ji)配(pei)制。

e、活動相沸點不要太(tai)低，否(fou)則輕易(yi)產(chan)生氣(qi)泡(pao)，導致(zhi)實驗無法進(jin)行(xing)。

f、在(zai)活動相配(pei)制好(hao)後(hou)，壹(yi)定(ding)要進行(xing)脫氣。除(chu)往溶解(jie)在活動相中(zhong)的微(wei)量氣(qi)體(ti)既(ji)有利於(yu)檢(jian)測，還可以防(fang)止(zhi)活動相中(zhong)的微(wei)量氧與(yu)樣(yang)品發(fa)生作(zuo)用(yong)。

3、活動相流速(su)的(de)選(xuan)擇：

因(yin)柱效是(shi)柱中(zhong)活動相線性流(liu)速的函(han)數(shu)，使用不同(tong)的流(liu)速可得(de)到(dao)不同(tong)的柱效。對(dui)於(yu)壹根(gen)特定(ding)的色(se)譜柱，要追(zhui)求(qiu)*柱效，使用*流速。對(dui)內徑為(wei)4.6mm的(de)色(se)譜柱，流(liu)速壹(yi)般選擇1ml／min，對(dui)於(yu)內徑為(wei)4.0mm柱，流(liu)速0.8ml／min為(wei)佳(jia)。

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