色(se)譜(pu)柱(zhu)應該(gai)怎(zen)樣維(wei)護(hu)？

色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)正確(que)使(shi)用(yong)和維(wei)護(hu)十分(fen)重(zhong)要(yao)，稍有(you)不慎(shen)就會(hui)降低(di)柱效(xiao)、縮(suo)短(duan)使用(yong)壽命(ming)甚(shen)至損壞(huai)。在色(se)譜(pu)操(cao)作過(guo)程中(zhong)，需要(yao)註(zhu)意下(xia)列問題，以(yi)維(wei)護(hu)色(se)譜(pu)柱(zhu)。
①　避(bi)免(mian)壓(ya)力和溫度的(de)急劇(ju)變化及任何(he)機械(xie)震動(dong)。溫度的(de)突(tu)然變化或者使色(se)譜(pu)柱(zhu)從高(gao)處(chu)掉下(xia)都會(hui)影(ying)響柱內(nei)的(de)填充狀(zhuang)況(kuang)；柱壓(ya)的(de)突(tu)然升(sheng)高(gao)或降(jiang)低(di)也(ye)會(hui)沖(chong)動(dong)柱(zhu)內(nei)填料，因此(ci)在調節流速(su)時應該(gai)緩慢進行(xing)，在閥進樣(yang)時閥的(de)轉(zhuan)動(dong)不能(neng)過(guo)緩（如(ru)前所述(shu)）。
②　應逐漸改變溶劑(ji)的(de)組(zu)成(cheng)，特別(bie)是(shi)反(fan)相色(se)譜(pu)中(zhong)，不應直(zhi)接(jie)從(cong)有(you)機溶劑(ji)改變為全(quan)部是(shi)水，反(fan)之(zhi)亦(yi)然。
③　壹般(ban)說來色(se)譜(pu)柱(zhu)不能(neng)反(fan)沖(chong)，只(zhi)有(you)生產者指明該(gai)柱(zhu)可以(yi)反(fan)沖(chong)時，才可以(yi)反(fan)沖(chong)除去留(liu)在柱頭(tou)的(de)雜(za)質(zhi)。否則反(fan)沖(chong)會(hui)迅速降低(di)柱效(xiao)。
④　選(xuan)擇(ze)使(shi)用(yong)適(shi)宜(yi)的(de)流動(dong)相（尤其(qi)是(shi)pH），以避(bi)免(mian)固定(ding)相被(bei)破壞(huai)。有(you)時可以(yi)在進樣(yang)器(qi)前面連(lian)接(jie)壹預柱，分(fen)析(xi)柱是(shi)鍵(jian)合(he)矽(gui)膠時，預柱為矽(gui)膠，可使(shi)流動(dong)相在進入(ru)分(fen)析(xi)柱之(zhi)前預先被(bei)矽(gui)膠“飽(bao)和”，避(bi)免(mian)分(fen)析(xi)柱中(zhong)的(de)矽(gui)膠基質被(bei)溶解。
⑤　避(bi)免(mian)將(jiang)基質復雜(za)的(de)樣品尤其(qi)是(shi)生物樣品直接註(zhu)入柱(zhu)內(nei)，需要(yao)對(dui)樣(yang)品進行(xing)預處(chu)理或者在進樣(yang)器(qi)和色(se)譜(pu)柱(zhu)之(zhi)間連接壹保(bao)護柱(zhu)。保護(hu)柱(zhu)壹般(ban)是(shi)填有(you)相似固(gu)定相的(de)短柱。保(bao)護柱(zhu)可以(yi)而(er)且(qie)應該(gai)經(jing)常更換。
⑥　經(jing)常用(yong)強溶劑(ji)沖(chong)洗(xi)色(se)譜(pu)柱(zhu)，清除保留在柱內(nei)的(de)雜(za)質(zhi)。在進行(xing)清洗(xi)時，對流路系統(tong)中流動(dong)相的(de)置(zhi)換應以(yi)相混(hun)溶的(de)溶劑(ji)逐漸過渡，每(mei)種流動(dong)相的(de)體(ti)積應是(shi)柱體(ti)積的(de)20倍(bei)左(zuo)右(you)，即常規(gui)分(fen)析(xi)需要(yao)50~75ml。
下(xia)面列舉(ju)壹些(xie)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)清洗(xi)溶劑(ji)及順序，作(zuo)為參(can)考：矽(gui)膠柱以正(zheng)已烷(wan)（或庚(geng)烷）、二氯(lv)甲烷和甲醇依次沖(chong)洗(xi)，然後再(zai)以相反(fan)順序依次沖(chong)洗(xi)，所有(you)溶劑(ji)都必(bi)須(xu)嚴(yan)格(ge)脫水。甲醇能(neng)洗(xi)去殘(can)留(liu)的(de)強極性(xing)雜(za)質(zhi)，已烷(wan)使(shi)矽(gui)膠表面重(zhong)新(xin)活(huo)化(hua)。反(fan)相柱(zhu)以水、甲醇、乙(yi)腈(jing)、壹氯(lv)甲烷（或氯(lv)仿）依次沖(chong)洗(xi)，再(zai)以相反(fan)順序依次沖(chong)洗(xi)。如(ru)果下(xia)壹步(bu)分(fen)析(xi)用(yong)的(de)流動(dong)相不含緩沖(chong)液(ye)，那麽(me)可以(yi)省略後用(yong)水沖(chong)洗(xi)這壹步(bu)。壹氯(lv)甲烷能(neng)洗(xi)去殘(can)留(liu)的(de)非極性(xing)雜(za)質(zhi)，在甲醇（乙(yi)腈(jing)）沖(chong)洗(xi)時重(zhong)復註(zhu)射(she)100~200μl四(si)氫(qing)呋喃(nan)數次(ci)有(you)助於(yu)除去強(qiang)疏(shu)水性(xing)雜(za)質(zhi)。四(si)氫(qing)呋喃(nan)與乙(yi)腈(jing)或甲醇的(de)混合(he)溶液(ye)能(neng)除去類(lei)脂(zhi)。有(you)時也(ye)註射(she)二甲亞碸(feng)數次(ci)。此(ci)外，用(yong)乙(yi)腈(jing)、丙(bing)酮和三氟(fu)醋酸(suan)（0.1%）梯(ti)度洗脫(tuo)能(neng)除去蛋白(bai)質汙(wu)染。
陽離(li)子(zi)交(jiao)換柱(zhu)可用(yong)稀酸(suan)緩沖(chong)液(ye)沖(chong)洗(xi)，陰離(li)子(zi)交(jiao)換柱(zhu)可用(yong)稀堿緩沖(chong)液(ye)沖(chong)洗(xi)，除去交(jiao)換性(xing)能(neng)強(qiang)的(de)鹽，然後用(yong)水、甲醇、二氯甲烷（除去吸(xi)附(fu)在固定相表面的(de)有(you)機物）、甲醇、水依次沖(chong)洗(xi)。
⑦　保存色(se)譜(pu)柱(zhu)時應將(jiang)柱(zhu)內(nei)充滿乙(yi)腈(jing)或甲醇，柱接頭(tou)要(yao)擰(ning)緊，防(fang)止(zhi)溶劑(ji)揮發幹燥。禁止(zhi)將(jiang)緩沖(chong)溶液(ye)留在柱內(nei)靜(jing)置(zhi)過(guo)夜或更(geng)長(chang)時間。
⑧　色(se)譜(pu)柱(zhu)使用(yong)過程(cheng)中，如(ru)果壓(ya)力升(sheng)高(gao)，壹種(zhong)可能(neng)是(shi)燒結(jie)濾片(pian)被(bei)堵(du)塞，這時應更(geng)換濾(lv)片(pian)或將(jiang)其(qi)取(qu)出(chu)進行(xing)清洗(xi)；另(ling)壹種(zhong)可能(neng)是(shi)大分(fen)子(zi)進入(ru)柱(zhu)內(nei)，使柱(zhu)頭(tou)被(bei)汙(wu)染；如(ru)果柱效降低(di)或色(se)譜(pu)峰變形(xing)，則可能(neng)柱(zhu)頭(tou)出(chu)現塌(ta)陷(xian)，死(si)體(ti)積增(zeng)大(da)。
在後兩種情(qing)況(kuang)發生時，小心擰開柱接頭(tou)，用(yong)潔凈(jing)小(xiao)鋼將(jiang)柱(zhu)頭(tou)填料取出(chu)1~2mm高(gao)度（註意把被(bei)汙(wu)染填料取凈(jing)）再(zai)把柱(zhu)內(nei)填料整平(ping)。然後用(yong)適(shi)當(dang)溶劑(ji)濕潤(run)的(de)固定相（與柱內(nei)相同(tong)）填滿色(se)譜(pu)柱(zhu)，壓(ya)平，再(zai)擰緊柱(zhu)接(jie)頭(tou)。這樣處(chu)理後(hou)柱(zhu)效能(neng)得(de)到改善，但(dan)是(shi)很難(nan)恢(hui)復(fu)到新(xin)柱的(de)水平。
柱(zhu)子(zi)失(shi)效通常是(shi)柱端(duan)部分(fen)，在分(fen)析(xi)柱前裝壹根與分(fen)析(xi)柱相同(tong)固定(ding)相的(de)短柱（5~30mm），可以(yi)起到保護(hu)、延(yan)長(chang)柱(zhu)壽(shou)命(ming)的(de)作用(yong)。采(cai)用(yong)保護(hu)柱會(hui)損失(shi)壹定(ding)的(de)柱效，這是(shi)值得(de)的(de)。
通常色(se)譜(pu)柱(zhu)壽命在正確(que)使(shi)用(yong)時可達(da)2年以(yi)上。以(yi)矽(gui)膠為基質的(de)填料，只能(neng)在pH2~9範圍(wei)內(nei)使用(yong)。柱子(zi)使(shi)用(yong)壹段時間後，可能(neng)有(you)壹些(xie)吸附(fu)作用(yong)強的(de)物質保(bao)留於(yu)柱(zhu)頂(ding)，特別(bie)是(shi)壹些(xie)有(you)色(se)物質更(geng)易看(kan)清被(bei)吸(xi)著在柱頂(ding)的(de)填料上。新(xin)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)在使用(yong)壹段時間後柱頂(ding)填(tian)料可能(neng)塌(ta)陷(xian)，使柱(zhu)效(xiao)下(xia)降，這時也(ye)可補(bu)加(jia)填料使柱(zhu)效恢(hui)復(fu)。
每(mei)次工(gong)作完(wan)後(hou)，好(hao)用(yong)洗脫(tuo)能(neng)力(li)強的(de)洗脫液(ye)沖(chong)洗(xi)，例如(ru)ODS柱宜(yi)用(yong)甲醇沖(chong)洗(xi)至基線平衡。當(dang)采(cai)用(yong)鹽緩沖(chong)溶液(ye)作流動(dong)相時，使用(yong)完(wan)後(hou)應用(yong)無鹽流動(dong)相沖(chong)洗(xi)。含鹵(lu)族(zu)元素(su)（氟(fu)、氯、溴(xiu)）的(de)化合(he)物可能(neng)會(hui)腐蝕(shi)不銹鋼(gang)管(guan)道，不宜長(chang)期(qi)與之(zhi)接(jie)觸。裝(zhuang)在HPLC儀上柱(zhu)子(zi)如(ru)不經常使用(yong)，應每(mei)隔(ge)4~5天(tian)開機沖(chong)洗(xi)15分(fen)鐘(zhong)。