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液(ye)相(xiang)色譜柱(zhu)使用(yong)過程(cheng)中(zhong)該如何(he)維護(hu)？

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壹、使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong)的維護(hu)

1、流(liu)動(dong)相的(de)使(shi)用(yong)和分析方法(fa)的(de)選(xuan)擇

流動(dong)相的(de)純(chun)度(du)、溶劑(ji)的(de)選(xuan)擇、適(shi)當(dang)分析方法(fa)的(de)使用(yong)與色譜柱(zhu)的性(xing)能(neng)和壽命(ming)密(mi)切(qie)相(xiang)關。

1.1 流動(dong)相的(de)選(xuan)擇

所選(xuan)用(yong)的流動(dong)相應(ying)與色譜柱(zhu)、待分析樣品相(xiang)兼(jian)容，即(ji)樣品、樣品溶(rong)液(ye)和流動(dong)相是互溶的。流動(dong)相能(neng)夠溶(rong)解(jie)樣品，避免(mian)樣品沈(chen)澱(dian)析出；同時(shi)還要(yao)求(qiu)流動(dong)相與(yu)樣品不發(fa)生化(hua)學反應(ying)，並且(qie)要(yao)求(qiu)與色譜柱(zhu)不能發(fa)生溶(rong)解(jie)或(huo)化學反應(ying)。

色譜分析應(ying)選(xuan)擇色譜級(ji)的流(liu)動(dong)相。通(tong)常分析純的(de)溶(rong)劑含(han)有(you)微(wei)量(liang)雜(za)質(zhi)，如(ru)有(you)機(ji)溶劑(ji)中的聚乙二醇(chun)、無機(ji)鐵(tie)離子（Fe+）等(deng)，作(zuo)為(wei)流動(dong)相大(da)量(liang)使(shi)用(yong)後會引起(qi)色譜柱(zhu)性(xing)能(neng)變化(hua)。最好是使用(yong)色譜純(chun)級或(huo)者(zhe)更(geng)高(gao)純度(du)的(de)試(shi)劑，盡(jin)量(liang)降低溶(rong)劑(ji)中雜(za)質(zhi)帶來的(de)損(sun)傷(shang)。

1.2 流動(dong)相過(guo)濾(lv)

使用(yong)色譜純(chun)試(shi)劑配(pei)制流動(dong)相，使(shi)用(yong)前需經(jing)0.45μm或(huo)者(zhe)更(geng)小(xiao)孔(kong)徑的(de)濾(lv)膜(mo)過(guo)濾(lv)和超聲(sheng)脫氣(qi)處(chu)理，減少灰塵(chen)、微生物等(deng)雜(za)質(zhi)堵(du)塞色譜柱(zhu)，尤(you)其是水溶性(xing)流(liu)動(dong)相易(yi)引起(qi)微(wei)生物生長而(er)造(zao)成(cheng)色譜柱(zhu)阻塞。流(liu)動(dong)相最(zui)好是現配現用(yong)，放(fang)置(zhi)時(shi)間最(zui)好不要超過2天(tian)。

1.3 流(liu)動(dong)相的(de)pH和緩沖(chong)鹽(yan)的選(xuan)擇

極端(duan)pH的(de)流動(dong)相會破(po)壞(huai)填料(liao)內(nei)的共(gong)價鍵(jian)，“溶解”矽膠，使固定相流(liu)失(shi)，從而(er)降(jiang)低柱效，縮(suo)短(duan)使用(yong)壽命。以(yi)矽膠作(zuo)基(ji)質(zhi)的(de)固定相壹般(ban)要求(qiu)pH在2.5~7範圍內(nei)使用(yong)。長期(qi)在pH>7或(huo)pH<2使用(yong)環境中(zhong)，矽膠會逐(zhu)漸(jian)溶解或(huo)者(zhe)表(biao)面(mian)鍵合的官(guan)能(neng)團會逐(zhu)漸(jian)流失。如(ru)果壹定要用(yong)高(gao)或(huo)低pH的(de)流動(dong)相，最(zui)好是選(xuan)用(yong)相適(shi)應(ying)的色譜填料(liao)。

1.4 流(liu)速(su)的控(kong)制

目前(qian)粒徑為(wei)1.8μm的UPLC的流速(su)常設為(wei)0.3~0.5mL/min，粒徑為(wei)5μm的HPLC分析流速(su)不大於1.5mL/min，粒徑為(wei)10μm半制備柱(zhu)流速(su)控(kong)制在3mL/min。流速過大(da)，壓力(li)升高(gao)，會引起(qi)色譜填料(liao)沖(chong)垮、塌陷(xian)。

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